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Título: Pequenos RNAs não codificantes em bactérias do complexo Burkholderia cepacia: contribuição para a sua identificação e caracterização do seu papel na virulência
Autor: Costa, Paulo Jorge Gomes Pereira da, 1987-
Orientador: Leitão, Jorge Humberto Gomes
Dias, Deodália Maria Antunes, 1952-
Palavras-chave: Biologia molecular
Expressão génica
Bactérias patogénicas
Burkholderia cenocepacia
Caenorhabditis elegans
Virulência
Teses de mestrado - 2011
Issue Date: 2011
Resumo: Nos últimos anos, um número crescente de trabalhos tem evidenciado que os pequenos RNAs reguladores não-codificantes (sRNAs) desempenham um papel basilar na regulação da expressão pós-transcricional de vários genes em procariontes. Entre esses genes, assumem particular importância aqueles cujos produtos constituem factores de virulência e de resposta a stresses vários. Os sRNAs permanecem praticamente desconhecidos no Complexo Burkholderia cepacia (Bcc). O Bcc compreende pelo menos dezassete espécies patogénicas oportunistas geneticamente próximas, capazes de causar infecções, particularmente graves em doentes com fibrose quística, em doentes imunocomprometidos e em doentes hospitalizados. O uso do nemátodo Caenorhabditis elegans como modelo de infecção permitiu identificar um mutante de B. cepacia IST408 cuja virulência foi severamente reduzida, devido à interrupção dum gene codificante para uma proteína 84% similar à chaperona de pequenos RNAs de Escherichia coli, a proteína Hfq. A conhecida interacção entre a proteína do Hfq2 e sRNAs potencia o interesse do uso desta proteína como ferramenta para o isolamento de sRNAs através de técnicas de co-purificação. Neste contexto, o presente trabalho contribuiu para a identificação e caracterização do papel de um sRNA, denominado mtvR, envolvido na virulência de Burkholderia cenocepacia J2315.
Over the last years, increasing evidence has shown that small noncoding regulatory RNAs (sRNAs) play a critical role in the post-transcriptional regulation of gene expression in prokaryotes. Among genes recognized to be subject to post-transcriptional regulation, particular attention has been given to those encoding determinants of virulence and resistance to various stresses. The roles played by sRNAs remain unknown in bacteria of the Burkholderia cepacia complex (Bcc). The Bcc includes opportunistic pathogens that belong to at least seventeen closely related species, able to cause severe and often lethal infections, particularly among cystic fibrosis patients, immunocompromised patients and hospitalized patients. Previous work from the IST research team led to the identification of a gene encoding a protein 84% similar to the Escherichia coli RNA chaperone Hfq. In the present work we have exploited the known interaction between Hfq2 and sRNAs in co-purification experiments, envisaging the identification of sRNAs from Bcc. In this context, this program contributed to the identification and characterization of the sRNA mtvR. This sRNA plays a role in the virulence of Burkholderia cenocepacia J2315, as demonstrated by experiments using the nematode Caenorhabditis elegans as an infection model.
Descrição: Tese de mestrado. Biologia (Biologia Humana e Ambiente). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2011
URI: http://hdl.handle.net/10451/4681
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